Q&A-索码生物

Q:

罕见病病人血液iPSC建系的意义

A:

1）突破样本稀缺瓶颈：将珍贵的一次性样本转化为可永久利用的资源 2）深入解析疾病本质：为在分子和细胞水平上揭示罕见病的发病机制提供关键模型 3）加速疗法开发：为药物筛选、基因治疗验证等提供高效、特异的平台，推动从基础研究向临床治疗的转化 4）保存未来希望：为将来可能的个体化基因/细胞治疗保存原始遗传材料

Q:

细胞出现空泡化

A:

可能是因为细胞老化，长期未及时传代，细胞受到氧化应激损伤。应该严格控制传代次数，及时冻存低代数细胞，优化培养环境。

Q:

iPSC细胞传代时的注意事项

A:

首先观察细胞汇合度至80%左右，且细胞状态良好可进行传代。一般情况下3-6天传代一次，即使克隆团较小、汇合度不足，也不建议连续培养7天以上。或者细胞汇合度较低，但干细胞集落过大，中央细胞生长不良也要进行传代。传代比例可根据细胞生长状态和实验需要按1：5-1：10进行传代。消化时在显微镜下观察细胞克隆出现裂缝时说明消化完全，应终止消化。若传代接种后的细胞多为单细胞而非小的细胞团块或细胞活率低，建议前24h内加入Y27632帮助细胞贴壁和存活，18-24h后更换不含y的新培养基，此后每天换液。

Q:

iPSC细胞复苏接种时发现大多为单细胞形态，24h后几乎不贴壁，是什么原因，该如何处理？

A:

我们公司发货的iPSC细胞一般为团块传代冻存，接种时细胞大多为单细胞形态主要原始是在复苏离心后吹打过度，导致细胞团块被吹散，iPSC在单细胞形态存活率较低，贴壁难度较高，如果在复苏24小时后发现细胞活率低，贴壁较少也要立即换液，iPSC的增值能力非常强大，即使只是少量细胞贴壁也可能养起来，但如果不及时换液就一定救不回来。