你以为它只是细胞的“盒饭”？其实它是一位运筹帷幄的“总指挥”！

在iPSC的培养世界里，我们日复一日地操作着换液、传代。那一瓶瓶清澈的维持培养基，在我们眼中，或许只是干细胞的“营养餐”，提供些氨基酸、维生素和糖分。

但今天，我们要揭开它神秘的面纱。这瓶看似简单的液体，实则是一个精心设计的“信号王国”，里面充满了决定细胞命运的“密语”与“指令”。

为什么iPSC可以如此“任性”？给它一点“颜色”（信号），它就能分化为神经、心肌或任何你想要的细胞。反之，若我们想让它维持“初心”——即无限增殖的多能性状态，就必须创造一个绝对纯净、稳定的环境。

这个环境的核心缔造者，就是维持培养基。它的首要任务，不是喂饱细胞，而是 “发号施令”——持续不断地告诉iPSC保持自我，避免分化。

维持培养基如何发号施令？关键就在于它精准调控的几条核心信号通路。让我们来认识一下这三位幕后“指挥官”：

1.TGF-β/Activin A 通路： “我是谁”

作用机制：这条通路是维持iPSC多能性（尤其是“初始态”Naïve状态向“始发态”Primed状态过渡）的关键。它通过激活下游的SMAD蛋白，直接上调核心多能性转录因子（如OCT4, SOX2, NANOG）的表达。简单说，它每天都在对细胞喊话：“记住，你是多能干细胞！你很强大！”

2. bFGF： “活下去，并增殖”

作用机制：bFGF是维持iPSC自我更新和增殖最重要的生长因子之一。它通过激活MAPK/ERK等通路，为细胞提供持续的增殖动力，同时与其他信号通路（如TGF-β）协同作用，共同抑制分化。

3. WNT 通路： “平衡大师”

作用机制：WNT通路在干细胞命运中扮演着复杂而微妙的角色。过强的WNT信号会驱动分化，而适度、稳定的WNT信号背景则是维持多能性所必需的。iPSC维持培养基会通过添加特定抑制剂（如IWP2）或激动剂，将WNT信号精确调控在一个“甜点”区间，既能支持自我更新，又不会触发分化。

在实际操作中，如何判断您的培养系统是否健康？请关注这些细胞信号的外在表现：

✔ 理想的克隆形态：边界清晰、扁平紧凑，核质比高

✔ 稳定的增殖速率：持续稳定的群体倍增时间

✔ 一致的多能性标志物表达：OCT4、SOX2、NANOG阳性率>90%

✔ 自发性分化率低：<10%

当这些指标出现波动时，往往意味着信号平衡被打破——可能是培养基成分失效，也可能是操作习惯需要调整。